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栢晖生物特色检测指标——同位素的测定:更所检测相关讯息so栢晖生物了解更多
发布时间: 2024 - 11 - 11
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发布时间: 2022 - 03 - 04
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铵态氮是自然界氮元素的一种存在形态,以铵根离子(NH4+)的形态存在和流通于土壤、植物、肥料和大气中。可以与其他形式的氮元素在一定条件下相互转化。今天栢晖给大家介绍一下如何通过2mol?L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法测定土壤中的铵态氮。方法原理2mol?L-1KCl溶液浸提土壤,把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用,生成水溶性染料靛酚蓝,溶液的颜色很稳定。在含氮0.05~0.5mol?L-1的范围内,吸光度与铵态氮含量成正比,可用比色法测定。试剂(1)2mol?L-1KCl溶液 称取149.1g氯化钾(KCl,化学纯)溶于水中,稀释至1L。(2)苯酚溶液 称取苯酚(C6H5OH,化学纯)10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定,须贮于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。(3)次氯酸钠碱性溶液 称取氢氧化钠(化学纯)10g、磷酸氢二钠(Na2HPO4?7H2O, 化学纯)7.06g、磷酸钠(Na3PO4?12H2O, 化学纯)31.8g和 52.5g?L-1次氯酸钠(NaOCl,化学纯,即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中,稀释至1L,贮于棕色瓶中,在4℃冰箱中保存。(4)掩蔽剂 将400g?L-1的酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O, 化学纯)与100g?L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 mol?L-1氢氧化钠0.5mL。(5)铵态氮(NH4+—N)标准溶液 称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4,分析纯]0.4717g溶于水中,洗入容量瓶后定容至1L,制备成含铵态氮(N)100ug ?mL –1的贮存溶液;使用前将其加水稀释20倍,即配制成含铵态氮(N)5ug ?mL –1的标准溶液备用。分析步骤(1)浸提 称取适量土样,准确到0.01g,置于150mL三角瓶中,按固液比1:5加入氯化钾溶液,塞紧塞子,在振荡机上振荡1h。取出静置,待土壤—氯化钾悬浊液澄清后,吸取一定量上层清液进行分析。如果不能在24h内进行,用滤纸过滤悬浊液,将滤液储存在冰箱中备用。(2)比色 吸取土壤浸出液2mL~10mL(含NH4+—N 2-25ug)放入50mL容量瓶中,用氯化钾溶液补充至10mL,然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL,摇匀。在20℃左右的室温下放置1h后(注1),加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物,然后用水定容至刻度。2h后,用1cm比色槽在625nm波长处(或红色滤光片)进行比色,读取吸光度。(3...
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发布时间: 2022 - 02 - 11
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超氧化物歧化酶(SOD)是生物体系中抗氧化酶系的重要组成成员,广泛分布在微生物、植物和动物体内。其是在上个世纪末才被发现,可以说是生物医学研究史上的一项重大成果,于人类生命研究具有极其重要的意义。今天我们就给大家分享一下如何通过比色法测定植物酶活SOD。图片来源于网络一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1.1 磷酸缓冲液:A液:0.2M的KH2PO4溶液?分析纯KH2PO4? 27.216克,用蒸馏水定容至1000毫升。?B液:0.2M的K2HPO4溶液?分析纯K2HPO4?3H2O?45.644克,用蒸馏水定容至1000毫升。或?A液:0.2M的NaH2PO4溶液?分析纯NaH2PO4?2H2O? 31.21克,用蒸馏水定容至1000毫升。?B液:0.2M的Na2HPO4溶液? 分析纯Na2HPO4?12H2O?71.64克,用蒸馏水定容至1000毫升。1.2 母液的配制:?(1)0.5M?磷酸缓冲液(PH=7.8):A液21.25ml+B液228.25ml定容至1000ml;?(2)130mM?Met(甲硫氨酸):取1.9399克Met?用磷酸缓冲液(PH=7.8)定容至100ml;?(3)750μM四氮唑蓝(NBT):取0.06133gNBT用磷酸缓冲液(PH=7.8)定容至100ml(避光保存);?(4)100μM?EDTA-Na2:取0.0372g?EDTA-Na2用磷酸缓冲液(PH=7.8)定容至1000ml;?(5)20μM?FD?(核黄素):0.00753gFD用磷酸缓冲液(PH=7.8)定容至1000ml(现配现用)。?1.3 SOD反应液:?磷酸缓冲液(PH=7.8):Met:NBT:EDTA-Na2:核黄素(FD):H2O的比例为15:3:3:3:3:2.5,按母液顺序配制。?二、主要仪器万分之一分析天平、紫外分光光度计、医用离心机、研钵三、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后,装入样本瓶放入4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 酶液的制备:?称取鲜样0.5g放入研钵中,加5毫升PH=7.8的磷酸缓冲液,冰浴研磨,匀浆倒入离心管中,冷冻离心20分钟(10000×g),上清液(酶液)倒入试管中,置于0~4℃下保存待用。?4.2 SOD的测定?取型号相同的试管,吸取20ul的酶液,加入3ml反应液,4000Lux照光(多用为环形日光灯的光照培养箱)30分钟(尽量做到照光情况一致)4.3 空白与对照的制备同时取四支试管,三支做对照(CK),一支做空白(不加酶液,以缓冲液代替);空白置暗处,对照(CK)与酶液同至于4000Lux条件下照光3...
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发布时间: 2021 - 12 - 31
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速效钾是土壤中可被植物吸收利用的组分,具有促进植物淀粉和糖分合成、增加油脂和蛋白质含量、增强作物抗逆性等重要作用。今天栢晖小编整理了如何通过醋酸铵—火焰光度计法来测定土壤中的速效钾~一、试剂(1)中性1.0mol/L NH4OAc溶液:称77.09 g NH4OAc溶于近1升水中,用稀HOAc或NH4OH调节至pH7.0,用水定容至1升。(2)K标准溶液:称取0.1907 g KCLmol/L NH4OAc溶液中,完全溶解后用1mol/L NH4OAc溶液定容至1升,即为含100 mg/L K的NH4OAc溶液。用时分别吸取此100mg/L K标准液0,2,5,10,20,40 ml放入100 ml容量瓶中,用1mol/L NH4OAc定容,即得0,2,5,10,20,40 mg/L K标准系列溶液。二、主要仪器1/1000天平、振荡机、火焰光度计、三角瓶(250ml,100ml)、漏斗(60ml)、滤纸、坐标纸、角匙、吸耳球、移液管(50ml)三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,取待测样品充分混匀后,按四分法缩减至 100g,粉碎,然后全部通过18目孔径筛,装入样品袋备用。四、分析步骤称取风干土样(1mm孔径)5.00 g于150ml三角瓶中,加1mol/L NH4OAc溶液50.0ml(土液比为1:10),用橡皮塞塞紧,在20—25℃下振荡30分钟用干滤纸过滤,滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定,在方格纸上绘制成曲线,根据待测液的读数值查出相对应的mg/L数,并计算出土壤中速效钾的含量。五、结果计算式中:C—待测液浓度mg/L;m—风干土重;V—加入浸提剂毫升数;
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发布时间: 2021 - 12 - 27
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之前,栢晖生物给大家整理分享过粗脂肪、粗灰分等指标的测定方法,今天咱们来看看如何通过残重法测定植物中的粗纤维。试验流程如下:一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1.1 1.25%硫酸:取相对密度1.84的浓硫酸13.0ml 加水稀释至1L。1.2 1.25%氢氧化钾溶液二、主要仪器万分之一分析天平、电热板、锥形瓶三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后,按四分法缩减至 100g,粉碎,籽粒全部通过20目筛,装入样品瓶备用。四、分析步骤4.1 称取干燥样品1-3.0g,移入500ml锥形瓶中,加入200ml煮沸的1.25%硫酸,加热使其微沸,保持体积恒定,维持30min,期间每隔5min摇动锥形瓶一次,充分混合瓶内物质。4.2 去下锥形瓶后用带有已知质量滤纸的漏斗过滤,并用热蒸馏水冲洗锥形瓶及漏斗,直至滤液用石蕊试纸测定为中性反应为止。4.3 再用200ml煮沸的1.25%氢氧化钾溶液将滤纸上的沉淀物完全洗入原锥形瓶内,将其加热至沸腾再继续30min,操作同4.1。4.4 煮沸后冷却,用原来所用已知质量的滤纸,用蒸馏水冲洗2~3次,再用乙醇和乙醚各洗涤一次。4.5 将滤纸和沉淀在100~105℃的烘箱中烘至恒重并称重。?五、结果计算粗纤维含量(%)=(M1/M2)×100%式中:M1--为烘干后残余物的质量,g;M2--为试样的质量,;100--换算因数。来源:栢晖生物整理。
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发布时间: 2021 - 12 - 07
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一、试剂所有试剂除注明者外,均为分析纯。1.1 磺基水杨酸:0.6克磺基水杨酸,定容至200ml1.2 酸性茚三酮(现配):3.75克茚三酮+90ml冰醋酸+36ml蒸馏水1.3 甲苯1.4 脯氨酸标准贮备液:在分析天平上精确称取25mg脯氨酸,倒入小烧杯中内,用少量蒸馏水溶解,然后倒入250ml容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,此标准液中每ml含脯氨酸100ug。 二、主要仪器万分之一分析天平、水浴锅、分光光度计三、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后,装入样本瓶放入4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 试样溶液准备称取鲜样0.3g,加入5ml磺基水杨酸,加盖,沸水浴10分钟,过滤,吸取滤液2ml,加2ml冰醋酸和3ml酸性茚三酮,沸水浴40分钟,冷却,加入5ml甲苯,充分振荡,静止分层,取上层甲苯溶液于比色皿中,520nm下比色。4.2 空白溶液制备除不加试样外,应用的试剂和操作步骤同4.14.3 标准曲线绘制吸取脯氨酸标准溶液,0、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3ml用蒸馏水定容至50ml容量瓶中,摇匀,各瓶中脯氨酸的浓度分别为0、1ug/ml、2ug/ml、3ug/ml、4ug/ml、5ug/ml及6ug/ml的系列标准浓度溶液,取7只试管分别取系列标准浓度的脯氨酸2ml,除不加试样外,其余操作步骤同4.1五、结果计算脯氨酸含量(%)=【C×V/(W×Vt×106)】×100式中:C--为从校准曲线或回归方程求得的2ml测定液中脯氨酸含量,ug/2mlV--为提取液体积,ml;W--为称取试样鲜重的质量,g;Vt--为测量液体积,ml;106、100--为换算因数。
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